摘要:Cytometric Bead Array (CBA) 技术是一种基于流式细胞检测系统的高通量、多重蛋白定量方法，广泛应用于生物医学研究中低丰度可溶性蛋白的分析。本文系统介绍了CBA技术的基本原理、标准实验流程及其主要技术特点，以阐明其在多重蛋白检测中的优势与应用价值。
一、Cytometric Bead Array 技术原理
CBA技术是一种基于流式细胞术的多重蛋白同步定量方法，适用于对单个样本中多种低浓度可溶性蛋白进行分析，尤其适用于细胞培养上清、血清等溶液体系。传统方法如蛋白质免疫印迹常因灵敏度限制难以准确检测微量蛋白，而CBA系统通过其独特设计实现了高通量与高灵敏度的多重检测。
该技术的核心是使用一系列直径均一、表面包被特异性捕获抗体的微球作为固相载体。微球通过嵌入不同强度的荧光染料进行编码，每种微球对应一种特定的目标蛋白。在检测过程中，混合的捕获微球与待测样本共同孵育，目标蛋白被相应微球上的捕获抗体特异性结合。随后加入荧光标记的检测抗体，形成“微球-捕获抗体-目标蛋白-检测抗体”的双抗体夹心复合物。
通过流式细胞仪对复合物进行分析：系统首先识别微球的编码荧光以确定目标蛋白种类，继而检测报告荧光的强度，该强度与目标蛋白的浓度成正比。借助标准曲线，可对样本中多种蛋白进行同步定量。
与传统的酶联免疫吸附测定技术相比，CBA技术具备以下优势：更高的检测灵敏度、更低的样本需求量、真正的多重同步检测能力，以及更简化的操作流程，显著提高了检测效率并减少了操作误差。
二、实验流程
基于CBA技术对人Th1、Th2及Th17相关细胞因子进行多重检测的标准流程主要包括以下步骤：
（一）标准品与试剂准备
制备系列浓度的人Th1/Th2/Th17细胞因子标准品用于建立标准曲线，并将针对不同目标因子的捕获微球等体积混合备用。
（二）样本前处理
根据预实验结果，必要时使用适当稀释液对待测样本进行稀释，以确保检测信号处于标准曲线的线性范围内。
（三）仪器校准
使用专用调节微球对流式细胞仪进行参数设置与校准，以保证信号检测的准确性与稳定性。
（四）免疫反应与孵育
将混合捕获微球、样本或标准品及荧光检测抗体共同孵育，形成完整的免疫复合物。
（五）数据采集
使用校准后的流式细胞仪采集样本数据，获取微球编码荧光与检测抗体报告荧光的信号。
（六）结果分析
利用配套软件建立标准曲线，计算各细胞因子的浓度，完成定量分析。
三、技术特点
CBA技术融合了酶联免疫吸附测定与流式细胞术的优点，在多重检测能力、灵敏度、操作效率等方面表现突出。
（一）多重同步检测能力
通过不同荧光编码的微球组合，单次检测最多可同步定量75种目标蛋白，显著提升检测通量并节约样本。
（二）高灵敏度与宽动态范围
检测灵敏度可达pg/mL级别，动态范围通常为0–5000 pg/mL，仅需一组标准曲线即可覆盖，减少了重复操作。
（三）低样本需求量
仅需微量样本即可完成多指标分析，适用于样本量有限的研究。
（四）操作简便高效
采用集成化流程，整个检测过程可在约3.5小时内完成，适合高通量筛选。
（五）检测组合灵活
可根据研究需求自由组合不同捕获微球，构建定制化检测面板，广泛应用于免疫学、细胞信号传导等领域。
（六）专业数据分析支持
配套软件可自动将荧光信号转化为蛋白浓度，并提供图形化结果，辅助数据解读与质量控制。
CBA技术以其多重、同步、灵敏、灵活的特点，为复杂生物样本中的蛋白质组学研究提供了高效可靠的定量分析平台，在生命科学与临床研究中具有重要的应用价值。
四、CBA 流式液相技术那个公司有？
LabEx为您提供专业、高效的CBA流式液相技术检测服务。CBA技术，即流式微球阵列技术，巧妙结合了流式细胞术的高通量优势与液相芯片的多重检测能力，可在单管中对同一样本中的多种可溶性蛋白（如细胞因子、趋化因子、磷酸化蛋白等）进行同步、定量分析。
| 货号 | Panel名称 | 种属 | 检测指标 |
| LXCBM06-1 | CBA小鼠炎症6因子Panel | Mouse | IFN-γ,IL-10,IL-6,TNF,IL-12p70,MCP-1 |
| LXCBM07-1 | CBA小鼠炎症7因子Panel | Mouse | IFN-γ,IL-10,IL-2,IL-4,IL-6,IL-17A,TNF |
| LXCBH06-1 | CBA人炎症6因子Panel 1 | Human | IL-10,IL-6,IL-1β,IL-8,TNF,IL-12p70 |
| LXCBH06-2 | CBA人炎症6因子Panel 2 | Human | IFN-γ,IL-10,IL-2,IL-4,IL-6,TNF |
