LabEx 流式服务实例分享——小鼠肿瘤的10色分析

本周分享的是LabEx采用BD Celesta（3激光12色）对小鼠肿瘤进行T细胞、NK细胞及调节性T细胞（Tregs）10色分析实例。的分析。

    

整个panel全部为包括表面marker和核内转录因子，抗体使用量按照厂商推荐。

    

样本类型：小鼠肿瘤

仪器：BD Celesta

实验Panel：

   

     

实验设置：

   

类型	管数	作用
Blank	1	调节电压，确认阴性细胞群位置
单阳管	10	调节补偿
样本管	1	正式样本管

   

实验步骤：

1、小鼠肿瘤按照说明书要求GentleMACs解离成单细胞悬液，过70um滤网，预冷1*PBS清洗（若有红细胞，可再进行裂红处理）。

2、细胞染色：按照Live/Dead、FcR阻断剂、表面的顺序进行染色。

   

实验结果

   

实验试剂

   

货号	名称	品牌
564406	Fixable Viability Stain 510	BD Pharmingen
561037	Ms CD45 APC-Cy7 30-F11	BD Pharmingen
557984	Ms CD3e Alexa 700 500A2	BD Pharmingen
561836	Ms CD4 PE-Cy5 RM4-5	BD Pharmingen
561109	Ms CD8a PerCP-Cy5.5 53-6.7	BD Pharmingen
566228	Ms CD25 BV421 3C7 25ug	BD Pharmingen
561067	Ms CD49B Pan-NK Cells FITC DX5	BD Pharmingen
560402	Ms Foxp3 Alexa 647 MF23	BD Pharmingen
563894	Ms CD45R/B220 BV786 RA3-6B2	BD Pharmingen
563015	CD11b BV605 M1/70	BD Pharmingen
554656	Stain Buffer FBS 500mL	BD Pharmingen
564219	Hu Fc Block Pure  Fc1.3216 50ug	BD Pharmingen
130-096-730	Tumor Dissociation Kit，mouse	Miltenyi Biotec
130-093-237	gentleMACS 25 C Tubes	Miltenyi Biotec
abs9101	1*红细胞裂解液	Absin
abs7008	70um细胞过滤器	Absin
abs9484	RPMI-1640培养基	Absin
abs972	胎牛血清（优级）	Absin
abs962	1*PBS	Absin

   

LabEx，让服务加速实验！！！

   

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基因水平：PCR Array、RT-PCR、PCR、单细胞测序 
蛋白水平：MSD、Luminex、CBA、Antibody Array、ELISA、Sengenics、Elispot、IsoPlexis、Olink 
细胞水平：细胞染色、细胞分选、细胞培养、细胞功能 
组织水平：多重荧光免疫组化、免疫组化、免疫荧光 
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