LabEx 流式服务实例分享——小鼠脾脏TH1/2/17/Treg免疫细胞的9色分析

LabEx用BD Celesta（3激光12色）对正常小鼠脾脏进行T细胞及相关亚群，调节性T细胞（Tregs）9色分析实例。

    

整个panel全部为包括表面marker、胞内因子和核内转录因子，抗体使用量按照厂商推荐。

    

样本类型：C57正常小鼠

仪器：BD Celesta

实验Panel：

   

     

实验设置：

   

类型	管数	作用
Blank	1	调节电压，确认阴性细胞群位置
单阳管	9	调节补偿
样本管	1	正式样本管

   

实验步骤：

1、小鼠脾脏研磨成单细胞悬液，过70um滤网，预冷1*PBS清洗

2、Ficol提取PBMC（若有红细胞，可再进行裂红处理），细胞计数（1.0x10E6个/ml）

3、24孔板种板，每孔1ml

4、细胞刺激：

4.1、每孔加入2ul刺激阻断剂；

4.2、37℃、5％CO2下孵育4-6小时；

4.3、孵育结束后吸取培养液至新的EP管中，300g离心5min；

4.4、弃上清，用1ml PBS重悬细胞沉淀，300g离心5min；

4.5、弃上清，用剩余液体重悬，用于后续实验操作；

5、细胞染色：

按照Live/Dead、FcR阻断剂、表面、破膜、胞内核内的顺序进行染色。

   

实验结果

   

实验试剂

   

   

LabEx，让服务加速实验！！！

   

相关文章

标志物分析+多色流式+多色组化，三管齐下，肿瘤免疫研究的天眼！

LabEx-流式相关服务

清凉一夏，低价来袭！LabEx邀您尽享流式新服务！

流式多因子检测技术(CBA)

液态流式技术(Luminex)

 

详见LabEx网站( www.u-labex.com)或来电咨询！ 
基因水平：PCR Array、RT-PCR、PCR、单细胞测序 
蛋白水平：MSD、Luminex、CBA、Antibody Array、ELISA、Sengenics、Elispot、IsoPlexis、Olink 
细胞水平：细胞染色、细胞分选、细胞培养、细胞功能 
组织水平：多重荧光免疫组化、免疫组化、免疫荧光 
数据分析：流式数据分析、组化数据分析、多因子数据分析